Seminarium Zakładu Biofizyki
sala nr 3091 (Zakładu Biofizyki, al. Żwirki i Wigury 93)
2009-04-03 (10:15) 
mgr Dorota Kubacka (Zaklad Biofizyki IFD UW)
Metoda ekspresji i oczyszczania białka eIF4E jako białka fuzyjnego z reduktazą dihydrofolianową
Eukariotyczny czynnik translacyjny 4E, eIF4E, jest jednym z głównych czynników regulujących proces inicjacji translacji. Dotychczas poznana rola tego czynnika, występującego w organizmach w postaci wielu izoform, dotyczy inicjacji translacji jak również jej czasowo-przestrzennej inhibicji, co pozwala na prawidłowy rozwój organizmów. Uzyskanie frakcji zrekombinowanego białka eIF4E, w pełni funkcjonalnego i wolnego od kapu, mającego zastosowanie w badaniach biochemicznych, biofizycznych i farmakologicznych nie jest problemem łatwym. Z reguły białko to występuje w formie nierozpuszczalnej w systemie bakteryjnym, co wymaga procesu renaturacji. Podczas seminarium przedstawię nowo opracowaną metodę ekspresji i oczyszczania eIF4E jako fuzyjnego białka z reduktazą dihydrofolianową, DHFR-eIF4E, otrzymywanego z frakcji rozpuszczanej.