Seminarium Zakładu Biofizyki

Bakteryjne fosforylazy nukleozydów purynowych PNP, charakteryzujące się niższą specyficznością niż PNP ze źródeł ssaczych, mogą znaleźć zastosowanie w terapii genowej niektórych nowotworów. Podczas prezentacji zostaną omówione wyniki miareczkowań fluorescencyjnych, których celem było wyznaczenie parametrów charakteryzujących wiązanie mutantów PNP z E. Coli: Asp204Ala-PNP, Arg217Ala-PNP i Asp204Asn-PNP z ligandem – fosforanem. Jeden z mutantów, Asp204Asn-PNP, mimo pochodzenia bakteryjnego przypomina właściwościami PNP ze źródeł ssaczych - nie wiąże adenozyny. Dla tego mutanta przeprowadzono próby uzyskania kryształów umożliwiających wyznaczenie struktury trzeciorzędowej białka. Udało się otrzymać kryształy w roztworach zawierających sole potasowe oraz PEG.

Bacterial Purine nucleoside phosphorylases PNP have less substrate specificity than mammalian that suggest a strategy for gene therapy treatment for tumors. During the presentation the fluorescence titration results will be discussed. The aim of was to determine the kinetic parameters characterizing the interaction of PNP mutants: Asp204Ala-PNP, Arg217Ala-PNP and Asp204Asn-PNP with the phosphate. In spite of bacterial source of Asp204Asn-PNP, it does not bind adenosine like the mammalian PNP. For this mutant crystallization experiments to produce a well scattering crystals were performed. The first crystals have appeared in potassium salts with PEG.